Пересмотр гистологических препаратов в Красногорске

Процедура пересмотра стекол

Для того, чтобы снизить риски ошибки в гистологическом заключении, существует практика пересмотра стекол в другой лаборатории. Пациент забирает гистологические стекла в лаборатории, проводившей первый анализ и передает их в другую лабораторию. При обращении в лабораторию пересмотр гистологических препаратов занимает два рабочих дня с момента доставки препаратов. Однако необходимо помнить, что при некачественно подготовленных стеклах (например, отсутствие опухоли на срезе) могут потребоваться дополнительные срезы, поэтому желательно вместе с гистологическими стеклами предоставить и оригинальные парафиновые блоки.

Сроки выполнения пересмотра

Результаты пересмотра готовых гистологических препаратов можно получить в течение 2-3 рабочих дней. В отдельных случаях срок ответа может быть увеличен до 3-10 рабочих дней: когда требуется изготовление новых гистологических препаратов из парафиновых блоков (при отсутствии стекол), когда необходимо изготовление дополнительных срезов из парафиновых блоков, когда необходимо проведение дополнительных гистохимических окрасок. В сложных диагностических случаях, когда необходимо проведение врачебного консилиума. После проведение пересмотра гистологических препаратов врач-патологоанатом или лечащий врач может рекомендовать проведение дополнительных исследований из представленных парафиновых блоков: иммуногистохимического исследования, молекулярно-генетического исследования (оплачивается отдельно).

Пять этапов подготовки гистологического слайда (готового образца)

1. Тканевая фиксация

Подготовка слайда начинается с фиксации образца ткани. Это важный этап подготовки ткани, и его цель —  предотвратить автолиз и гниение тканей. Для достижения наилучших результатов образцы биологических тканей следует сразу же после сбора поместить в фиксатор. Хотя существует множество типов фиксаторов, большинство образцов фиксируют в 10% нейтральном забуференном формалине. Оптимальное соотношение объема формалина к образцу должно быть не менее 10: 1 (например, 10 мл формалина на 1 см 3 ткани). Это позволит большинству тканей адекватно зафиксироваться в течение 24-48 часов. Емкости с формалином должны быть закрытыми, герметичными и правильно маркированными.

2. Перенос образцов в кассеты.

После фиксации образцы обрезаются с помощью скальпеля, чтобы они могли поместиться в кассету с тканью с соответствующей маркировкой. Образцы не должны быть настолько большими, чтобы заполнять кассету, их обрезают так, чтобы не касаться краев. Кроме того, они не должны быть слишком толстыми (в идеале они должны быть менее 4 мм). Заполненные кассеты для тканей затем хранят в формалине до начала обработки.

3. Обработка тканей

Обработка тканей на тонкие микроскопические срезы обычно производится с помощью парафинового блока следующим образом:

обезвоживание, при котором образец погружается в спирт с возрастающей концентрацией для удаления воды и формалина из ткани;

клиринг, при которой органический растворитель, такой как ксилол, используется для удаления спирта и пропитывания парафином;

заливка, когда образцы пропитаны заливочным агентом — обычно парафином. Ткань окружается большим блоком расплавленного парафина, образуя то, что теперь называется «блоком». Когда блок затвердевает, он обеспечивает опорную матрицу, позволяющую разрезать очень тонкие срезы.

4. Разделение

Теперь образец ткани готов к разрезанию на части, которые можно поместить на предметное стекло. Воск удаляется с поверхности блока, чтобы обнажить ткань. Блоки охлаждают на охлажденной тарелке или лотке для льда в течение 10 минут перед разделением. Микротом используется для срезания очень тонких срезов ткани с блока в виде ленты. Микротом можно предварительно настроить на разрезание различной толщины, но большинство тканей разрезаются примерно на 5 мкм. После разрезания тканевые ленты осторожно переносят в теплую водяную баню. Заряженные слайды лучше всего подходят для этого процесса — они улучшают адгезию ткани к стеклу и помогают снизить вероятность смывания срезов с слайда во время окрашивания. Слайды должны быть четко помечены, а затем дать им высохнуть в вертикальном положении при 37⁰С в течение нескольких часов, чтобы аккуратно растопить излишки парафина, оставив срез ткани нетронутым.

5. Окрашивание

Большинство клеток прозрачны и в неокрашенном виде кажутся почти бесцветными. Поэтому гистохимические пятна (обычно гематоксилин и эозин) используются для обеспечения контраста срезов ткани, делая структуры ткани более заметными и более простыми для оценки. После окрашивания поверх образца ткани на предметном стекле устанавливают покровное стекло с использованием клея оптического качества, чтобы защитить образец.

Готовый препарат для гистологического слайда

Итак, как видите, подготовка слайдов для гистологии — это не легкий ветерок, а довольно замысловатое произведение искусства! Гистология отлично подходит для визуализации целых тканей с низким разрешением, она ограничивает, если вы хотите исследовать субклеточные структуры, например, при изучении изменений в опухолях головного мозга. В этом случае требуется более подробный и мощный метод, такой как электронная микроскопия рака мозга.

Пересмотр гистологических препаратов назначается при:

• невозможности клинически оценить характер патологического образования;
• невозможности клинически установить точный диагноз и определить дальнейшую тактику ведения пациента;
• подозрении на наличие злокачественного заболевания.

Материал для исследования: образец ткани (в парафиновом блоке).

Провести пересмотр гистологических препаратов в Красногорске можно в лаборатории. Цена на проведение пересмотра гистологических препаратов зависит от объема биоматериала для пересмотра.